مقدمة إلى أدوات ووظائف زراعة الخلايا من أجل تبادل التكنولوجيا التجريبية الخلوية
ينقسم تكوين الخلايا بشكل عام إلى أربع مناطق: منطقة التحضير ومنطقة التحضير ومنطقة التخزين ومنطقة التعقيم.
الوظائف الرئيسية لمنطقة التحضير هي التنظيف والتطهير والتحضير ؛ تُستخدم منطقة التحضير بشكل أساسي لإعداد وسائط الاستنبات والكواشف ؛ تُستخدم منطقة التخزين للبنك الخلوي وتخزين البضائع ؛ المنطقة المعقمة هي المكان الذي يغير فيه العاملون في المختبر ملابسهم ويعزلون ويزرعون. يمكن تقسيم عملية زراعة الخلايا إلى أربعة أجزاء وفقًا لوظائفها: ثقافة الخلية والتخزين والتحضير والتعقيم.
1 ، أداة ثقافة الخلية ومقدمة
[1. طاولة عمل نظيفة للغاية]
يتم استخدام المنضدة فائقة النقاء ذات التدفق العمودي بشكل عام في زراعة الخلايا. تحت الضغط الإيجابي ، لا يوجد تسرب للغاز. يتم حماية كائن التشغيل فقط ، ولكن لا يتم حماية الموظفين وبيئة المختبر.
يحقق الإشعاع فوق البنفسجي وظيفة التعقيم. التعقيم بالأشعة فوق البنفسجية (السطح) + التعقيم بالأوزون (الزاوية الميتة ، الحاجز مغلق). يستمر كل إشعاع فوق بنفسجي لمدة 20-30 دقيقة ، ويتم نفخ الهواء لمدة 10 دقائق قبل الاستخدام (انتبه لتغير الهواء في غرفة الثقافة). تصل النظافة إلى الدرجة 100.
بعد 3000 ساعة ، ستنخفض طاقة المصباح فوق البنفسجي إلى 70٪ من الأصلي. استبدل قطعة قماش الفلتر الخشنة على الجزء العلوي في الوقت المناسب وقم بإزالتها بانتظام للتنظيف.
[2. خزانة السلامة الأحيائية]
تحت الضغط السلبي ، لا يتسرب الغاز ، مما لا يحمي العينة فحسب ، بل يركز أيضًا على حماية المشغل والبيئة. تحمل خلايا الأمان الثانوية الفيروسات (مثل hele / KB) ، والعينات البشرية السريرية الأولية المستزرعة (الفطريات) ، والتجارب المتعلقة بالفيروس البطيء.
[3. اسطوانة CO2]
تستخدم اسطوانات ثاني أكسيد الكربون بشكل أساسي لتخزين غاز ثاني أكسيد الكربون. في عملية زراعة الخلايا ، يجب إجراء معظم الخلايا بشرط أن يكون محتوى ثاني أكسيد الكربون 5٪. يتم توصيل أسطوانة CO2 بشكل أساسي بالحاضنة من أجل الصيانة المستقرة لمحتوى CO2.
[4. مجهر مقلوب]
يعتبر المجهر المقلوب من المعدات الروتينية الضرورية في العمل اليومي لمختبر زراعة الخلايا. يتم استخدامه بشكل أساسي لفهم نمو الخلايا ومراقبة حدوث العدوى. إذا سمحت الأموال ، يوصى باختيار مجهر تباين الطور ، أو مجهر تشريح ، أو مجهر مضان ، أو نظام تسجيل فيديو أو جهاز تصوير فيلم بفاصل زمني مزود بنظام كاميرا ، يمكنه تصوير وتسجيل نمو الخلية في أي مكان زمن.
[5. جهاز طرد مركزي للطاولة]
أجهزة الطرد المركزي هي أداة خاصة تستخدم قوة الطرد المركزي لفصل وترسيب السائل المختلط (المحتوي على المواد الصلبة). وهي تستخدم بشكل أساسي لتحضير تعليق الخلية ، وضبط كثافة الخلية ، وغسل الخلايا وجمعها. معدل الطرد المركزي في مزرعة الخلايا هو بشكل عام 300xg (حوالي 1000 دورة في الدقيقة) لمدة 5-10 دقائق. ستؤدي سرعة الدوران العالية جدًا إلى موت الخلية. وفقًا للاحتياجات المختلفة ، هناك المزيد من أجهزة الطرد المركزي الوظيفية للاختيار من بينها ، مثل السعة الكبيرة وأجهزة الطرد المركزي ذات درجة الحرارة القابلة للتعديل وأجهزة الطرد المركزي عالية السرعة وأجهزة الطرد المركزي للتجميد منخفضة الحرارة.
[6. حاضنة CO2]
ثاني أكسيد الكربون هو منتج استقلابي للخلايا ، ومكون أساسي لنمو الخلايا ، ويرتبط أيضًا بالحفاظ على الرقم الهيدروجيني لوسط المزرعة. في زراعة الخلايا ، يعتبر O2 و CO2 شرطين ضروريين لنمو الخلايا. تحتوي حاضنات ثاني أكسيد الكربون على أنواع جافة ورطبة ، ويتم تحديد ظروف الاستزراع بشكل عام عند 37 درجة مئوية و 5٪ من ثاني أكسيد الكربون. يُمنع الماء الموجود في وعاء الماء في حاضنة ثاني أكسيد الكربون من التلوث بالماء المعقم + بديل منتظم لمدة أسبوعين + مادة حافظة (0.02٪ أزيد الصوديوم أو 2٪ كبريتات النحاس).
[7. لوحة عد الخلايا (جهاز)]
عداد الخلية عبارة عن أداة عد يتم التحكم فيها بواسطة كمبيوتر دقيق تدمج العد والإحصاءات والعرض. إنه موثوق ومريح للاستخدام.
[8. ماصة]
وتتمثل الوظيفة الرئيسية للماصة في امتصاص وإزالة السائل مثل وسط الثقافة أثناء ثقافة الخلية. نطاق القياس الرئيسي المستخدم في زراعة الخلايا يتكون من 10ul / 100ul / 200ul / 1000ul.