زراعة الخلايا الحيوانية وتطورها التكنولوجي في إنتاج اللقاحات الفيروسية
اللقاح هو عامل مناعي تلقائي للوقاية من الأمراض المعدية ، ويتكون من الكائنات الدقيقة المسببة للأمراض (مثل البكتيريا والفيروسات وما إلى ذلك) ومستقلباتها من خلال الحد من الفيروسات الاصطناعية أو تعطيل النشاط أو الهندسة الوراثية. وفقًا للأنواع المختلفة من مسببات الأمراض المعدية التي تمنعها ، يمكن تقسيمها تقريبًا إلى لقاحات بكتيرية ولقاحات فيروسية. يجب الآن تحضير العديد من اللقاحات الفيروسية المستخدمة في السكان من خلال عملية زراعة الفيروس أو التنقية أو التركيز أو التعطيل أو التحلل. نظرًا لأن الفيروسات هي نوع من الكائنات الحية الدقيقة الطفيلية المتخصصة في الخلايا المضيفة ، يجب أن يتم تكاثرها في الخلايا المضيفة الخاصة بها. وبالتالي،
1 - العملية العامة لزراعة الخلايا الحيوانية
تشير ثقافة الخلايا الحيوانية إلى زراعة مجموعات الخلايا الحيوانية الحية في المختبر. في الوقت الحاضر ، ستستخدم العديد من مجالات التكنولوجيا الحيوية هذه التكنولوجيا. تلعب زراعة الخلايا دورًا وقيمة خاصة في مجال الطب على وجه الخصوص. على سبيل المثال ، يتم تحقيق العديد من اللقاحات أو الأدوية المعدلة وراثيًا من خلال زراعة الخلايا في عملية البحث والإنتاج. تشمل الأدوات والمعدات المستخدمة بشكل شائع لزراعة الخلايا الحيوانية غرفة معقمة ، ومنضدة عمل فائقة النظافة ، وثلاجة منخفضة الحرارة ، ومقياس درجة الحموضة ، ومعقم بخار الضغط ، وحاضنة درجة حرارة ثابتة كهربائية ، وجهاز ثقافة ، وحاضنة ثاني أكسيد الكربون ، وإناء حمام مائي بدرجة حرارة ثابتة ، ومجهر مقلوب ، وطرد مركزي ، مرشح معقم ، جهاز الغسيل ، لوحة عد الخلايا وأداة تكنولوجيا الخلايا الإلكترونية ، إلخ ، يمكن لمعدات أتمتة ثقافة الخلايا cfam لشركة Shenyang GREAT ELITES Intelligent Equipment Co.، Ltd. أن تدرك الثقافة المضاعفة للخلايا ، ويمكن أن تصل النظافة إلى فئة GMP إلى مستوى نظافة. إنها مناسبة للمؤسسات التي تحتاج إلى عدد كبير من الخلايا المستنبتة. يمكن تقسيم ثقافة الخلية إلى ثقافة الخلية الأولية وثقافة الخلايا الفرعية.
1.1 زراعة الخلايا الأولية
زراعة الخلايا الأولية هي عملية يتم فيها إخراج أنسجة مختلفة من جسم الحيوان من الجسم ، ومعالجتها بأنزيمات مختلفة (التربسين شائعة الاستخدام) ، أو عوامل مخلبية (شائعة الاستخدام EDTA) أو طرق ميكانيكية ، وتوزع في خلايا مفردة ، ويتم تربيتها في وسط مناسب ، حتى تتمكن الخلايا من البقاء والنمو والتكاثر.
ومع ذلك ، هناك أيضًا بعض العيوب في زراعة الخلايا الأولية ، مثل العوامل الخارجية المحتملة ، والفشل في التحقق من التوحيد مسبقًا ، والاختلافات الكبيرة بين الدفعات بسبب تأثير عمر المتبرع والحالة الصحية. لذلك ، أصبح استخدام خلايا المرور المستقرة لزراعة هذه الفيروسات بدلاً من الخلايا الأولية هو اتجاه التطور المستقبلي.
1.2 ثقافة خلية ثقافة فرعية
في الثقافة الفرعية ، عندما تنجح الثقافة الأولية ، مع تمديد وقت الثقافة والانقسام المستمر للخلايا ، يحدث تثبيط الاتصال بسبب الاتصال بين الخلايا ، ويتباطأ معدل النمو أو حتى يتوقف ؛ من ناحية أخرى ، سيكون ضارًا أيضًا بالنمو أو التسمم بسبب عدم كفاية العناصر الغذائية وتراكم المستقلبات. في هذا الوقت ، من الضروري تقسيم الثقافة إلى أجزاء صغيرة وتلقيحها في وعاء استنبات آخر (زجاجة) للزراعة. هذه العملية تسمى الثقافة الفرعية أو إعادة الثقافة. بالنسبة للثقافة أحادية الطبقة ، فإن 80٪ من الخلايا المتكدسة أو المتكدسة حديثًا هي مرحلة الثقافة الفرعية المثالية. تشير زراعة الخلايا الفرعية في إنتاج اللقاح إلى عملية زراعة خطوط الخلايا المستقرة ، وإزالة خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد المخصصة للإنتاج ، وزراعتها بعد إنعاش الخلية.