الظروف الغذائية لزراعة الخلايا
الظروف الغذائية لزراعة الخلايا
1. الثقافة المتوسطة
يحتوي وسط زراعة الخلايا على العديد من العناصر الغذائية اللازمة لنمو الخلايا ، بما في ذلك الكربوهيدرات والأحماض الأمينية والأملاح غير العضوية والفيتامينات وما إلى ذلك. وفقًا للاحتياجات الغذائية للخلايا المختلفة ، هناك مجموعة متنوعة من الوسائط الاصطناعية للاختيار من بينها ، مثل ebss ، النسر ، MEM ، rpmll640 ، DMEM ، إلخ.
2. المكونات الأخرى المضافة
بالإضافة إلى العناصر الغذائية الأساسية التي توفرها الوسائط الاصطناعية المختلفة ، يجب إضافة مكونات أخرى مثل المصل والعوامل وفقًا للخلايا المختلفة وأغراض الاستزراع المختلفة.
يوفر المصل مواد مهمة مثل المصفوفة خارج الخلية وعامل النمو والترانسفيرين ، ويشيع استخدام مصل بقري الجنين. يجب تحديد نسبة المصل المضافة وفقًا للخلايا المختلفة وأغراض البحث المختلفة. 10٪ ~ 20٪ مصل يمكن أن يحافظ على النمو السريع وانتشار الخلايا ، وهو ما يسمى بالنمو المتوسط ؛ من أجل الحفاظ على النمو البطيء أو خلود الخلايا ، يمكن إضافة 2٪ - 5٪ مصل ، وهو ما يسمى وسط ثقافة الصيانة. ومع ذلك ، هناك أيضًا مواد ضارة بنمو الخلايا وتكاثرها في مصل الدم ، مثل المكمل والغلوبولين المناعي وبعض العوامل المثبطة للنمو ؛ التكوين غير واضح ، مما يؤثر على تحليل النتائج ؛ يختلف نشاط المصل للحيوانات المختلفة والدفعات المختلفة ، مما يؤثر على ثبات تأثير المزرعة.
الجلوتامين هو مصدر مهم للنيتروجين لنمو الخلايا ويلعب دورًا مهمًا في عملية نمو الخلايا والتمثيل الغذائي. ومع ذلك ، فإن الجلوتامين غير مستقر للغاية في المحلول ومن السهل أن يتحلل. يمكن أن يتحلل بحوالي 50٪ بعد 7 أيام عند 4 ℃ ، لذلك يجب إضافة الجلوتامين قبل الاستخدام.
من أجل منع التلوث ، يجب إضافة كمية معينة من المضادات الحيوية إلى وسط المزرعة.