الاحتياطات الخاصة بزراعة الخلايا
الاحتياطات الخاصة بزراعة الخلايا
(1) عند استنبات خلية معينة لأول مرة ، يجب عليك أولاً البحث عن اسم الخلية لفهم المعلومات ذات الصلة ، بما في ذلك وسط المزرعة ، والمصل ، والمواد المضافة ، ووقت الهضم الطبيعي ، ووقت المرور ، وما إلى ذلك بالنسبة لخلايا معينة (مثل كخلايا أولية مستنبتة) ، من الضروري الرجوع إلى الأدبيات ذات الصلة للحصول على طرق زراعة أكثر دقة.
(2) عند دخول الخلية إلى ثقافة الخلية ، يجب اتباع الخطوات التالية بدقة:
① تأكد من أن جميع الحلول والمواد الاستهلاكية لتشغيل الخلية قد تم تطهيرها واختبارها دون مشاكل. لا تستخدم الحلول والمواد الاستهلاكية غير المؤكدة. لا تقترض حلول الآخرين إلا في ظل ظروف خاصة.
② تأكد من لف أطراف الثياب أو ربط أطراف المعطف الأبيض.
حدد كمية الكحول في مصباح الكحول وقم بتجديده إذا لزم الأمر.
④ تأكد من أن جميع الحلول والمواد الاستهلاكية المطلوبة في متناول اليد. من أجل فتح غطاء الزجاجة بيد واحدة ، يمكن فك جميع أغطية الزجاجة قبل التجربة.
⑤ حاول ألا تصب المحلول مباشرة إلا إذا لم يحترق فم الزجاجة. إذا فشل السكب و التصق المحلول بفم الزجاجة ، يرجى تنظيف محيط فم الزجاجة بعناية بمنشفة ورقية مرشوشة بنسبة 75٪ كحول (لا تلمس فم الزجاجة) وحرقه على الزجاجة. لهب.
⑥ إذا لم تكن المواد الاستهلاكية المستخدمة نظيفة أثناء التشغيل ، فيجب استبدالها في الوقت المناسب.
⑦ نظف في الوقت المناسب بعد التجربة ، وحافظ على منطقة العمل نظيفة ومرتبة ، وأخيراً نظف الطاولة بنسبة 75٪ كحول.
(3) منع تلوث الخلايا
المستلزمات المعملية تمنع التلوث. يجب تنظيف الكواشف والمواد الاستهلاكية والمعدات المستخدمة في زراعة الخلايا وتطهيرها تمامًا ، ويجب أن يكون تعقيم المحاليل المختلفة دقيقًا ، ولا يمكن استخدامها إلا بعد أن يكون اختبار التعقيم سالبًا. يجب تنظيف غرفة العمليات والمعدات المعقمة المتبقية وتطهيرها وتعقيمها بانتظام.
② منع التلوث أثناء التشغيل.
③ الملابس التي يسهل توليدها للكهرباء الساكنة أو تمتص الغبار يجب استبدالها بمعاطف بيضاء قبل دخول الخلايا.
④ قبل بدء التجربة ، من الضروري التأكد من عدم وجود مشكلة في القفازات. طالما أن القفازات ملامسة لأشياء خارج خزانة السلامة البيولوجية ، يجب تطهير القفازات في الوقت المناسب.
⑤ بعد دخول غرفة ثقافة الخلية ، أغلق الباب واجلس وامش أقل قدر ممكن لتجنب التأثير على الستارة الهوائية لخزانة السلامة الأحيائية. امسح يديك وأغطية الزجاجات باستخدام 75٪ من كرات القطن الكحولية قبل العمل. تحقق بدقة من المعدات والحلول والخلايا المستخدمة مسبقًا. لا تحضر أدوات ملوثة أو غير معقمة إلى الغرفة المعقمة ، ناهيك عن استخدامها بشكل عرضي ، وذلك لتجنب التلوث على نطاق واسع.
يجب أن يكون تشغيل الخلايا خفيفًا. يجب فتح فم الزجاجة في المنطقة المعقمة حول اللهب ، ويجب وضع فم الزجاجة حول اللهب من أجل الدوران والحرق البسيط. احرص على عدم ترك اللهب يحرق فم الزجاجة البلاستيكية.
⑦ أثناء العملية التجريبية ، يجب أن يكون قسم خزانة السلامة الأحيائية منخفضًا قدر الإمكان لتقليل المحادثة. عند العطس أو السعال ، يجب ألا تواجه منطقة العمل لتجنب التلوث غير الضروري.
⑧ يجب وضع غطاء الزجاجة مقلوبًا بعيدًا عن نفسه لمنع تلوث غطاء الزجاجة بسبب سوء التشغيل.
⑨ لا تمر فوق الحاوية المفتوحة لتجنب تلوث الخلايا الناجم عن سقوط أجسام غير معروفة على الملابس.
⑩ أثناء العملية التجريبية ، انتبه لاستبدال ماصة Pasteur ورأس الماصة والماصة في الوقت المناسب ، ولا تقم بتنفيذ أنبوب واحد حتى النهاية. في حالة الاتصال بأشياء غير نظيفة أو غير محددة ، يجب التخلص منها مباشرة. بعد التجربة ، يجب تنظيفها في الوقت المناسب للحفاظ على نظافة المختبر وترتيبه. أخيرًا ، يجب تنظيف سطح الطاولة بنسبة 75٪ كحول.
(4) منع التلوث المتبادل للخلايا
① عند إجراء مجموعة متنوعة من عمليات زراعة الخلايا ، يجب تمييز الأدوات المستخدمة بدقة ، ومن الأفضل تمييزها لتحديد الهوية. يتم تنفيذ العملية بالتسلسل ، وتتم معالجة خلية واحدة فقط في كل مرة. عندما يتم تنفيذ عدة خلايا وعمليات متعددة معًا ، فمن المحتمل أن يحدث التباس.
② أثناء تبادل السوائل أو عملية المرور ، يجب ألا يلمس رأس الماصة والماصة المرفقان بالخلايا فم زجاجة الكاشف ، وذلك لتجنب إدخال الخلايا في وسط المزرعة وتلويث الخلايا الأخرى.
③ بمجرد شراء جميع الخلايا أو إدخالها من أماكن أخرى أو إنشائها بنفسها ، يجب حفظها وتجميدها في الوقت المناسب. في حالة التلوث ، يمكن إنعاش الخلايا والاستمرار في الزراعة.