ما هو نوع مستنبت الخلية وكيف يتم ذلك؟
تتمثل زراعة الخلايا الحيوانية في أخذ الأنسجة ذات الصلة من جسم الحيوان ، وتوزيعها في خلايا فردية (باستخدام التربسين أو الكولاجيناز) ، ثم وضعها في وسط استنبات مناسب للسماح لهذه الخلايا بالنمو والتكاثر.
ما هي أنواع وسائط زراعة الخلايا؟
وفقًا لتاريخ تطور وسائط زراعة الخلايا ، يمكن تقسيم وسائط زراعة الخلايا تقريبًا إلى عدة أنواع ، مثل محلول الملح المتوازن ، ووسائط زراعة الخلايا الطبيعية ، ووسائط زراعة الخلايا الاصطناعية ، ووسائط زراعة الخلايا الخالية من المصل ، ووسائط استنبات الخلايا مع محدودية مكونات كيميائية.
1. المتوسطة DMEM ثقافة الخلية
يتم الحصول على DMEM (الوسيط الأساسي المعدل من Dulbecco) بواسطة Dulbecco على أساس وسيط MEM. تتضاعف كمية كل مكون وتنقسم إلى نوعين: سكر منخفض (1000 مجم / لتر) وسكر مرتفع (4500 مجم / لتر). تنمو الخلايا بسرعة. من الأفضل استخدام نسبة عالية من الجلوكوز لزراعة الخلايا السرطانية ذات الالتصاق السيئ والمستنسخات ، وغالبًا ما يتم استخدامه لزراعة خلايا المايلوما من الورم الهجين والخلايا المحولة المنقولة بالحمض النووي.
2. وسط الثقافة الأساسية العصبية
يمكن أن يوفر العناصر الغذائية الأساسية لنمو الخلايا العصبية.
3. Ipl-41 حشرة متوسطة
تم تصميم وسيط الحشرات Ipl-41 للتوسع على نطاق واسع في خط خلايا Spodoptera frugiperda ، ويستخدم أيضًا بشكل شائع للتعبير عن البروتين بواسطة نظام تعبير baculovirus (BEVS). متوسط Ipl-41 هو تحسين على صيغة IPL الأصلية. تم تطويره بواسطة Weiss et al. من مختبر علم أمراض الحشرات التابع لوزارة الزراعة الأمريكية. تم استخدامه للتوسع على نطاق واسع لخطوط الخلايا المشتقة من Spodoptera meadowensis. أضاف فايس مصل بقري جنيني ووسيط TPB إلى الوسط الأساسي ، وأدرك بنجاح الثقافة المستمرة واسعة النطاق لخط خلايا ipl-21 AE (III).
يتم استخدام الوسيط بشكل أساسي لاستنبات وصيانة خطوط الخلايا المشتقة من حرشفية الأجنحة وتضخيم فيروسات هذه الخطوط الخلوية. تم استخدام وسيط Ipl-41 أيضًا للتعبير عن البروتين المؤتلف لفيروس baculovirus في خلايا Spodoptera الخالية من المصل.
1.1 محلول ملح متوازن (BSS)
يتكون BSS بشكل أساسي من الأملاح غير العضوية والجلوكوز. وتتمثل وظيفتها في الحفاظ على توازن الضغط الاسموزي للخلايا ، والحفاظ على استقرار الأس الهيدروجيني وتوفير تغذية بسيطة. يستخدم بشكل أساسي لشطف الخلايا وتحضير الكواشف الأخرى.
في الوقت الحاضر ، المصل المستخدم في زراعة الخلايا هو بشكل أساسي مصل الأبقار ، كما تتم زراعة بعض الخلايا الخاصة بمصل الدم البشري ومصل الحصان. يعتبر مصل الأبقار مناسبًا لمعظم خلايا الثدييات ، ولكن لا يُستبعد أنه من الأنسب استخدام مصل حيواني آخر عند زراعة خلايا معينة. يحتوي المصل على بروتينات بلازما مختلفة ، عديد ببتيدات ، دهون ، كربوهيدرات ، عوامل نمو ، هرمونات ، مواد غير عضوية ، إلخ. تحقق هذه المواد التوازن الفسيولوجي في تعزيز نمو الخلايا أو تثبيط نشاط النمو.
1.2 وسط زراعة الخلايا الاصطناعية
وسط الاستزراع التخليقي هو نوع من وسط الاستزراع الذي يتم تصنيعه وتصميمه بشكل مصطنع وتحضيره بمواد كيميائية وفقًا لتكوين وسط الاستزراع الطبيعي. أول وسيط أساسي تم تطويره (MEM) هو في الأساس خليط متساوي التوتر بدرجة الحموضة يحتوي على الملح والأحماض الأمينية والفيتامينات والعناصر الغذائية الأساسية الأخرى. على هذا الأساس ، تم تطوير DMEM و IMDM و ham F12 و prmi1640 وغيرها من وسائط زراعة الخلايا الاصطناعية بشكل مستمر.